| 培養基名稱: | 曲霉鑒別培養基，曲霉素瓊脂基礎，曲霉鑒別培養基基礎 |
|---|---|
| 英文名稱: |
Aspergillus Differentiation Medium ，Aspergillus Differentiation Medium Base |
| 培養基類型: | 選擇性培養基，鑒別培養基 |
| 產品目錄號: | M716-02 |
| 產品規格: |
500g 氯霉素溶液需另購。 |
| 保存條件: | 避光，密封，陰涼干燥處保存。 |
| 產品性狀: |
麥秸色粉末。 凝膠呈琥珀色或麥秸色，略半透明。 |
| 注意事項: | 避免攝入、呼入、皮膚接觸。配制時在 通風櫥中進行，戴口罩、手套、護目鏡。 |
| 相關產品: |
PDA培養基 AFPA培養基 改良察氏肉湯 沙氏瓊脂（SDA培養基） |
產品描述：
曲霉鑒別培養基（Aspergillus Differentiation Medium）是一種曲霉菌選擇性和鑒別性固體培養基，用于鑒別和檢測食品中產黃曲霉毒素的曲霉，特別是黃曲霉和寄生曲霉。
用于從食品中分離和增菌酵母和霉菌的理想的培養基應該具備以下條件：能夠回收所有有活性的繁殖體；限制霉菌的擴張；阻遏細菌的生長；輔助對真菌的鑒別。曲霉鑒別培養基幾乎完全滿足以上條件。
黃曲霉（Aspergillus flavus）和寄生曲霉（Aspergillus parasiticus）是潛在的產黃曲霉毒素的真菌。黃曲霉和寄生曲霉尤其容易在油料作物的種子、可食用的堅果和麥片中存在。黃曲霉毒素的危害性極大。黃曲霉毒素對人體是有致癌性的，吃了含黃曲霉毒素的食品會導致肝癌和免疫力下降而感染其它疾病。禽類對黃曲霉素尤其敏感，在1994年，印度有超過20萬只雞死于黃曲霉毒素污染的種子。牛雖然對黃曲霉毒素不敏感，但吃了污染的飼料后，毒素可能會轉移到牛奶中。美國食品藥品委員會（FDA）已經對食品和飼料中容許的黃曲霉毒素水平設立了明確的規定：食品和飼料中黃曲霉毒素容許水平是20ppb，而牛奶是0.5ppb（黃曲霉毒素M1）。
黃曲霉是一種透明的霉菌，在曲霉鑒別培養基上黃曲霉菌落的反面呈現很深的橘黃色，這種色素沉著是該菌種的鑒別特征之一。這種橘黃色色素是由培養基中的鐵離子與曲霉酸或新曲霉酸反應生成的。
本配方是對Bothast和Fennel的曲霉鑒別培養基的改良。被推薦用于快速檢測和增菌這兩種能夠產黃曲霉毒素的真菌。曲霉鑒別培養基相對于其他真菌培養基有以下優勢：
1. 可溶性鐵鹽和酵母提取物的添加改善了色素生成水平，黃曲霉和寄生曲霉菌落的反面呈現很濃的黃色/橙色，而這正是這兩種菌的鑒別性特征。
2. 蛋白胨與酵母提取物的合理配比，改善了黃曲霉的生長速度。
3. 氯硝胺和氯霉素的存在加強了對細菌和快速生長的真菌的抑制性。
曲霉鑒別培養基的用途
曲霉鑒別培養基是理想的黃曲霉和寄生曲霉檢測培養基。
曲霉鑒別培養基用于曲霉增菌。
曲霉鑒別培養基也用于曲霉的計數和鑒定。
曲霉鑒別培養基的配方與配制方法
配方 g/L
蛋白胨 10
酵母提取物 20
檸檬酸鐵銨 0.5
氯硝胺 0.002
瓊脂 15
pH 6.3 ± 0.2
配制方法：
1. 稱取45.5g培養基粉末，加1000ml去離子水，邊加熱邊攪動至完全溶解。
2. 121°C高溫蒸汽滅菌15min。
3. 待冷卻至55°C左右時，加入2ml濃度50mg/ml的氯霉素溶液，混勻后倒平板。
曲霉鑒別培養基的使用方法
食品中黃曲霉與寄生曲霉的檢測方法
1. 樣品處理：取40g食品樣品和200ml 0.1%蛋白胨水，用勻漿器分散。或者將樣品加到蛋白胨水中，每隔一段時間震蕩幾下，持續30分鐘。
2. 樣品稀釋：用0.1%蛋白胨水將處理過的樣品分別稀釋10倍、20倍和40倍。
3. 接種：分別吸取0.1ml稀釋后的樣品，用涂布棒涂布在瓊脂平板表面。
4. 培養：30°C下，培養42-43小時后觀察菌落形態。
5. 計數符合特征的菌落。該數據作為每克食品中黃曲霉和寄生性曲霉的菌落數。
結果分析
米曲霉（Aspergillus oryzae）菌落也具有以上特征。米曲霉在亞洲發酵食品尤其是黃豆醬的制作工藝中起到重要作用，但是在其它食品中很少能夠分離到。
30°C條件下培養時，黑曲霉菌落的大小和質地都與黃曲霉接近，但是反面顏色是黃白色的，43小時以后開始由黑色分生孢子出現，很容易與黃曲霉區分開來。
黃曲霉在曲霉鑒定培養基上的菌落形態見下圖
黃曲霉與寄生曲霉菌落形態的比較見下圖
標準菌株在曲霉鑒別培養基中的生長情況
標準菌株 拉丁名稱及ATCC編號 菌落特征
黃曲霉 Aspergillus flavus ATCC22547 淺黃色孢子,
菌落背面呈橘黃色
寄生曲霉 Aspergillus parasiticus ATCC28285 乳白色孢子,
菌落背面呈橘黃色
黑曲霉 Aspergillus brasiliensis ATCC9642 黑色孢子,
菌落背面呈黃白色
大腸桿菌 Escherichia coli ATCC25922 不長