| 培養基名稱: | 卵磷脂吐溫80乳糖肉湯培養基，乳糖肉湯培養基（卵磷脂+吐溫80） |
|---|---|
| 英文名稱: |
Lactose Broth，Lactose Broth with Lecithin and Tween |
| 培養基類型: | 營養培養基，鑒別培養基 |
| 產品目錄號: |
M227-01 |
| 產品規格: | 250g 查看其它規格 |
| 保存條件: |
避光，密封，陰涼干燥處保存。 |
| 產品性狀: |
土黃色粉末。 液體為淺黃色，透明。 |
| 注意事項: |
避免攝入、呼入、皮膚接觸。配制時在通風櫥中進行，戴口罩、手套、護目鏡。 |
| 相關產品: | 乳糖肉湯培養基 |
產品描述：
乳糖肉湯培養基（Lactose Broth）是大腸菌群和沙門氏菌檢測和預增菌液體培養基。乳糖肉湯培養 基是十分常用的培養基，用于檢測食品、乳制品和水中的大腸菌群，也用于預增菌待測樣品中的沙門氏菌（見下文食品中沙門氏菌的檢測 和鑒定實驗流程）。
乳糖肉湯培養基（卵磷脂+吐溫80）的工作原理：
大多數非沙門氏菌可以發酵乳糖，乳糖發酵產生酸性的副產物，使培養基的pH降低，進而對競爭菌群 產生制菌效應。加工食品中沙門氏菌以較低含量存在，而且沙門氏菌細胞可能處于虛弱狀態。乳糖肉湯為沙門氏菌的回收提供理想的環境 ，該培養基能夠讓受傷的細胞修復并稀釋潛在的毒性物質。增菌后的乳糖肉湯培養基中含有較高的沙門氏菌/非沙門氏菌比率。
乳糖肉湯培養基也用于檢測食品中的大腸菌群。用于檢測大腸菌群時，在加入待測樣品后，培養基濃度必須保持不變。加入卵磷脂和吐溫 的乳糖肉湯培養基有助于中和消毒劑或防腐劑，這些成分可能抑制細菌細胞。中和這些殘留物能減弱它們的抑制作用，輔助亞致命性受損 的細胞的回收。被美國公眾健康協會推薦用于執行和確認檢測飲用水、乳制品中的大腸菌群的評估實驗（Presumptive Test）。
培養基配方中的乳糖為乳糖發酵型微生物的直接碳源。牛肉提取物提供微量元素和生長因子，蛋白胨是有機氮源。卵磷脂和吐溫起到中和 毒素的作用。
乳糖肉湯（卵磷脂+吐溫80）的用途：
Lactose Broth被FDA用于待測食品樣品中沙門氏菌的預增菌。
乳糖肉湯培養基被多種標準檢測方法采用，應用最廣的是檢測水、食品中的大腸菌群和沙門氏菌。
該培養基還被推薦用于非無菌制品的沙門氏菌與大腸桿菌的微生物限度試驗。
卵磷脂吐溫80乳糖肉湯培養基配方與配制方法
| 培養基成分： | 含量：g/L |
|---|---|
| 牛肉提取物 | 3.0 |
| 明膠蛋白胨 | 5.0 |
| 乳糖 | 5.0 |
| 卵磷脂 | 0.7 |
| pH |
6.9± 0.2 |
配制方法：
1. 稱取脫水培養基13.7g，5ml吐溫-80，用1L去離子水溶解。
2. 分裝20ml到含有德拉姆發酵管的試管中。
3. 121°C高溫蒸汽滅菌15min。
滅菌后的液體培養基置于2-8ºC保存，蓋緊管蓋。避免光線直射。
實驗方法——水中大腸菌群的檢測
接種方法與注意事項：
1. 將待測樣品用接種到胰蛋白胨大豆肉湯培養基（TSB培養基），培養18-24h。將菌液稀釋10倍。
2. 用10ul定量接種環，沾取稀釋后的培養液接種到20ml乳糖肉湯液體培養基中。
3. 35°C（或44.5°C）下，有氧培養。
4. 在培養24 ± 2 h時檢查生長情況和發酵管中氣泡生成量，若無明顯結果，則繼續培養，在48 ± 3 h時再次檢查結果，如果液體變渾濁且倒置的德拉姆發酵管中有氣體生成，則為陽性結果。
5. 將乳糖發酵陽性結果的試管中的培養物轉接到選擇性瓊脂培養上做后續的鑒定實驗。
實驗結果與分析
所有的腸桿菌科細菌在該培養基中都能良好生長，發酵產生的酸除了使pH發生改變外，其中的丁酸還 會給培養物散發強烈的臭味。
以下2個圖片是使用標準菌株對乳糖肉湯培養基測試的結果
| -- | 圖 1 | 圖 2 |
|---|---|---|
| 產氣 | + | - |
| 測試菌種 | 大腸桿菌 | 空白對照 |
從食品樣品中增菌和回收沙門氏菌——實驗方法
在使用前，確保液體培養基溫度恢復到室溫。
1. 轉移25g固體樣品或25ml液體樣品到無菌容器中，加入225ml無菌的乳糖肉湯培養基。用勻漿器均質。也可以每隔一分鐘震蕩幾下，如此持續30min，確保樣品均勻分散到培養基中。35ºC，培養24 小時。
2. 轉移1ml上清液到合適的加富型肉湯中，如TT肉湯（Tetrathionate Broth）和亞硒酸鹽胱氨酸肉湯（Selenite Cystine Broth）。35ºC培養24小時。
3. 用接種環轉移上清液到合適的選擇性培養基上，如HE瓊脂(Hektoen Enteric Agar)、XLD瓊脂（XLD Agar）和亞硫酸鉍瓊脂（Bismuth Sulfite Agar）。在35ºC，培養24小時。
