產品名稱: | 濾膜法乳糖葡萄糖醛酸苷瓊脂;MLGA培養基;m月桂基硫酸鹽顯示瓊脂 |
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英文名稱: | Membrane Lactose Glucuronide Agar;MLGA;M-Lauryl Sulfate Chromogen Agar |
培養基類型: | 選擇與鑒別培養基、顯色培養基 |
級別: | for microbiology |
品牌: | ELITE-MEDIA(艾禮培養基) |
產品目錄號: | M335-01、M335-02 |
產品規格: | 88g、250g(添加劑需另購) |
產品外觀: | 粉色均一粉末。 |
滅菌后顏色與澄清度: | 粉紅色半透明凝膠。 |
保存條件: | 密封,2-25°C保存。制好的培養基可以在4℃保存1周。 |
注意事項: | 避免攝入、吸入、皮膚接觸。 |
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產品描述:
濾膜法乳糖葡萄糖醛酸苷瓊脂(Membrane Lactose Glucuronide Agar)即MLGA培養基,是一種顯色培養基,用于快速鑒別和計數水和其它材料中的大腸桿菌和其它大腸菌。該培養基簡化了大腸桿菌和大腸菌的濾膜技術,將兩步過濾減少為一步,并且無需進一步的驗證步驟。MLGA培養基被英國環境署《飲用水微生物學》(2002)所引用,用于分離和計數大腸菌和大腸桿菌(包括O157:H7)。原理:
蛋白胨和酵母提取物提供氨基酸、維生素和其它化合物。月桂基硫酸鈉抑制革蘭氏陽性菌。丙酮酸鈉有能夠起到保護受損細胞的作用,幫助大腸菌的活化和生長。乳糖是可被大腸菌發酵的糖類,通過β-半乳糖苷酶水解,產生的酸使酚紅指示劑變黃色(菌落呈黃色)。X-Gluc是一種顯色底物,能被大腸桿菌產生的β-葡萄糖醛酸苷酶裂解,結果是產生藍色菌落,再與乳糖發酵產酸結合,最終表現為綠色菌落。一般來說,由于綠色菌落是大腸桿菌的專一性很高,無需進一步驗證。但是如果要做進一步驗證,可以選擇很多試驗,如吲哚試驗。
藍色菌落可能是乳糖陰性的大腸桿菌,但更多是氣單胞菌。藍色菌落應該初步認定是大腸菌,以進一步試驗。黃色菌落幾乎不會是大腸桿菌,而綠色菌落幾乎不會不是大腸桿菌,然而,也有例外。一些少見的芽孢桿菌和葡萄球菌能夠在濾膜法乳糖葡萄糖醛酸苷瓊脂上生長,產生黃色菌落。但是這些菌落很容易通過在麥康凱瓊脂上的菌落特征或者通過革蘭氏染色鑒別開來。
配方與配制方法:
成分 | g/L |
蛋白胨 | 40.0 |
酵母提取物 | 6.0 |
乳糖 | 30.0 |
酚紅 | 0.2 |
十二烷基硫酸鈉 | 1.0 |
丙酮酸鈉 | 0.5 |
X-Gluc (BCIG) | 0.2 |
瓊脂 | 10.0 |
Final pH 7.4±0.2 (25°C) |
配制方法:
用1000ml蒸餾水重懸88g本產品。121°C高溫蒸汽滅菌15min。冷卻至50℃時,倒入無菌的培養皿中。
實驗方法
對于100ml處理過的液體,應該用Φ 47mm,0.45μm濾膜過濾,已獲得20-80菌落數。如果預計樣本中細菌含量較高,則采用體積較少的液體,或者進行稀釋。將過濾后的濾膜放置在MLGA培養基表面,確保沒有氣泡。推薦的培養過程為,現在30°C培養4h,然后37°C培養14h,以提供活化率。最早12h即可觀察到結果,但是為了獲得更可靠的結果,平板應該培養至少18h。從培養箱內取出平板后,要在15min內讀取結果。因為在冷卻過程中黃色可能會有所改變。大腸桿菌菌落呈綠色,其它大腸菌菌落為黃色。統計綠色和黃色菌落數,計算每毫升中大腸菌的數量,用CFU/ml的方式表示。37°C培養24h后,培養物特征如下:
標準菌株 (ATCC) | 生長情況 | 菌落顏色 |
Escherichia coli (ATCC25922) | +++ | 綠色 |
Klebsiella pneumoniae (ATCC13883) | ++ | 黃色,黏液狀 |
Enterobacter aerogenes (ATCC13048) | +++ | 黃色 |
Pseudomonas aeruginosa (ATCC27853) | +++ | 粉色 |
Staphylococcus aureus (ATCC25923) | - | - |
Bacillus subtilis (ATCC6633) | - | - |
Salmonella serotype Enteritidis (ATCC13076) | ++ | 粉色 |