| 培養基名稱 | MLSTB-MT培養基 (ISO)，十二烷基硫酸鹽胰蛋白示（MUG+色氨酸） |
|---|---|
| 英文名稱: |
Modified Lauryl Sulphate Tryptose Broth with MUG &Tryptophan (ISO)，MLSTB-MT (ISO) |
| 培養基類型: | 鑒別培養基 |
| 產品目錄號: | M245-01 |
| 產品規格: |
250g 其它規格請聯系我們 |
| 保存條件: | 密封，陰涼干燥處保存。制備好的培養基2-8°C避光保存。 |
| 產品性狀: |
麥秸色粉末。 琥珀色透明液體。在冰箱中冷藏的液體培養基會形成沉淀或渾濁，在室溫下變清澈。 |
| 注意事項: | 避免攝入、呼入、皮膚接觸。配制時在通風櫥中進行，戴口罩、手套、護目鏡。 |
| 相關產品: | 十二烷基硫酸鹽胰蛋白示肉湯 |
產品描述：
MLSTB-MT培養基（Modified Lauryl Sulphate Tryptose Broth with MUG &Tryptophan）是大腸桿菌鑒別液體培養基，用于檢測食品、水、奶制品中的大腸菌群和大腸埃希氏菌。
本產品配方采用ISO標準配方。
LST培養基工作原理
大腸菌群時革蘭氏陰性桿菌，能夠快速發酵乳糖產氣（水不溶性氣體）。更為準確的定義是35°C條件下能夠在LST培養基和BGLB培養基中生長，并且發酵乳糖產氣的革蘭氏陰性桿菌。在44.5°C條件下，還能夠在EC肉湯中發酵乳糖產氣的屬于大腸菌群的一個子集——糞大腸菌群。
表面活性劑如膽鹽、蓖麻油酸鈉，一直以來作為抑制成分，用于配制選擇性培養基。十二烷基硫酸鈉（SDS）在大腸菌選擇性培養基中效果最好，完全阻止革蘭氏陽性菌生長。MLSTB-MT可以在小量接種的情況下支持大腸菌的密集生長并產生大量氣體。磷酸鹽是pH緩沖系統，與氯化鈉一起可以通過減慢乳糖發酵微生物生長速度來改善產氣量。色氨酸是吲哚試驗的底物。向培養后的培養基中加入0.5ml科瓦克試劑（二甲基氨基苯甲醛），1min后上層培養基變粉紅色。
向培養基中加入4-甲基傘型酮-β-D-葡糖苷酸（MUG）可以提高檢測大腸埃希氏菌的靈敏度。不產氣的大腸埃希菌菌株也能用MUG鑒別。MUG是一種生熒光化合物。大腸埃希氏菌具有合成Beta-葡萄糖苷酶的能力，水解MUG生成熒光化合物。在366nm波長的紫外燈下，培養基顯熒光，實現大腸埃希氏菌的快速檢測。
MLSTB-MT培養基的用途：
MLSTB-MT培養基是ISO 11866- 1:2005規定的用于MPN計數法初步檢測水、工業廢水食品中的大腸菌群。
MLSTB-MT培養基被規定（HPA National Standard Method D5）用于增菌大腸菌群，和初步驗證牛奶及奶制品中大腸埃希氏菌的存在。
MLSTB-MT培養基配方與配制方法
| 培養基成分： | 含量：/L |
|---|---|
| 胰蛋白示 | 20.0 g |
| 乳糖 | 5.0 g |
| K2HPO4 | 2.75 g |
| KH2PO4 | 2.75 g |
| NaCl | 5.0 g |
| 十二烷基硫酸鈉（SDS) | 0.1 g |
| 4-甲基傘型酮-β-D-葡糖苷酸（MUG） | 0.1 g |
| L-色氨酸 | 1.0 g |
| 終溶液pH | 6.8 ± 0.2 |
配制方法：
1. 稱取36.7g本品，加水1L去離子水溶解。
2. 分裝10ml培養基到16x160mm試管中，確保液面沒過倒置的德拉姆發酵管。
3. 121°C高溫蒸汽滅菌15min。
實驗方法
Add 1ml of test sample per tube of single-strength medium. For double-strength medium add 10ml of test sample per tube. Repeat for each further dilution.
Incubate all inoculated tubes at 30 C for 24 hours (+ 2 hours). Incubation may be extended for up to 48 hours (+ 2 hours) if gas formation and/or turbidity not observed at 24 hours (+ 2 hours).
After incubation, add 0.5ml sodium hydroxide solution to all tubes. Examine for fluorescence under a long-wave (360-366nm) UV lamp. Add 0.5ml indole (Kovac’s) reagent to all tubes showing fluorescence. Mix & observe after 1 minute. The presence of indole (positive tube) is indicated by the formation of a red colour in the alcoholic phase.
結果與分析
在30°C條件下，在24h-48h內培養基變渾濁并且發酵管中出現氣泡的視為大腸菌群。在紫外燈下（波長366nm）培養基顯熒光（如上圖），且吲哚試驗結果陽性為大腸埃希氏菌，如下圖。
