產品名稱: | Rakay-Ray瓊脂基礎;乳酸菌選擇性瓊脂基礎;RRA培養基 |
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英文名稱: | Rakay Ray Agar Base;Lactic Acid Bacteria Selective Agar Base |
培養基類型: | 選擇性培養基 |
級別: | for microbiology |
品牌: | ELITE-MEDIA |
產品目錄號: | M281-01、M281-02 |
產品規格: | 250g、500g 培養基補充劑需另購 |
產品外觀: | 麥秸色均一粉末。極易吸潮。 |
顏色與澄清度: | 淺黃色,透明至略不透明的凝膠。 |
保存條件: | 密封,陰涼干燥處保存。制備好的培養基2-8°C避光保存。 |
注意事項: | 避免攝入、呼入、皮膚接觸。 |
相關產品: | 改良乳酸添加劑(Rakay-Ray瓊脂添加劑) |
產品描述:
Rakay-Ray瓊脂 (Rakay Ray Agar, Base)也稱乳酸菌選擇性瓊脂(Lactic Acid Bacteria Selective Agar),是乳酸菌選擇性培養基,用于選擇性分離啤酒釀造工藝中的乳酸細菌。本產品配方與OXOID CM0777 和 SIGMA 02538 配方相同。
工作原理
乳酸桿菌家族中的多個成員構成了釀造過程中重要的腐敗菌。營養需求的多樣性和生長環境的不同給檢測這些微生物帶來了很大困難。相當多的被開發用來改善這一狀況。Rakay-Ray瓊脂養基是優化的乳酸桿菌培養基,由Rakay-Ray培養基3號(Rakay-Ray Medium No. 3)改良而來,后者衍生于通用啤酒瓊脂(Universal Beer Agar)。 Rakay-Ray培養基3號給出了最高的菌落計數結果,支持最多數目的菌株的計數。Rakay-Ray培養基3號能夠使得釀酒廠快速準確地監測啤酒中的微生物。酪蛋白酶解物、肝臟濃縮物、酵母提取物提供生長所需的氮、碳、氨基酸、礦物質、維生素和微量元素。天冬氨酸鉀和谷氨酸鉀是補充的氨基酸來源。麥芽糖用于檢測不能利用葡萄糖作為碳源的乳桿菌。果糖是食果糖乳桿菌(Lactobacillus fructivorans)的碳源。葡萄糖是足球菌可發酵的碳源。司班80或吐溫80是非離子型表面活性劑,輔助乳酸菌對脂肪酸的利用,是乳酸細菌的生長刺激因子。N-乙酰葡萄糖胺、鹽酸甜菜堿、肝臟濃縮物也是生長刺激劑。檸檬酸氫二銨和磷酸二氫鉀是緩沖劑。而金屬鹽為乳桿菌的代謝提供重要的離子。另外加入的苯乙醇(3 g/l)抑制革蘭氏陰性菌生長,兩性霉素B(5 mg/l)和放線菌酮(7mg/l)抑制酵母菌和霉菌的生長。
用途:
Rakay-Ray瓊脂,由Saha,Sondag和Middlekauff開發,被歐洲釀造公約(EBC)和美國釀造化學家協會(ASBC)推薦用于檢測釀造過程和啤酒中的乳酸菌。配方與配制方法
成分 | g/L |
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酵母提取物 | 5 |
酪蛋白酶解物 | 20 |
肝臟濃縮物 | 1 |
麥芽糖 | 10 |
D-葡萄糖 | 5 |
果糖 | 5 |
鹽酸甜菜堿 | 2 |
檸檬酸氫二銨 | 2 |
天冬氨酸鉀 | 2.5 |
谷氨酸鉀 | 2.5 |
七水硫酸鎂 | 2 |
四水硫酸錳 | 0.66 |
磷酸二氫鉀 | 2 |
N-乙酰葡萄糖胺 | 0.5 |
瓊脂 | 17 |
終溶液pH | 5.4± 0.2 |
Rakay-Ray瓊脂添加劑
培養基補充劑成分: | 含量/L |
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0.1%放線菌酮 | 7.0 mL |
去水山梨糖醇單油酸酯 | 10 mL |
2-苯乙醇 | 3 g |
10mg/mL 兩性霉素B(可選) | 0.5 mL |
配制方法:
1. 稱取本產品77.1g,加1000ml去離子水,加入1ml吐溫80,加熱溶解。
2. 分裝到試管或瓶中。
3. 121°C滅菌15min。
4. 冷卻至50-55°C,加入1管乳酸菌選擇性補充劑(7ml 0.1%放線菌酮溶液、3g 2-苯乙醇)。混勻后倒入無菌培養皿。
實驗方法
表面接種涂布0.1ml樣本,或者將樣本濾過濾膜,將濾膜放在瓊脂表面。25-30°C,厭氧環境下培養。
覆蓋法
55°C 水浴加熱的4ml無菌Rakay-Ray瓊脂,加入1ml樣本到試管中。混合均勻后,立即倒入到凝固的Rakay-Ray 瓊脂表面。25-30°C,厭氧條件下培養。
培養:
一般來說,培養4天即可達到效果。測試用菌株的培養時間不需要超過24h。但是生長速度較慢的微生物所需時間可能達到7天。根據待測樣本中乳酸菌的菌種不同,也可以采用半厭氧條件。
結果與分析
以下是37°C 培養18-24h后的培養物特征。ATCC標準菌株在Rakay-Ray瓊脂中生長情況如下:
中文名稱 ATCC標準菌株 生長情況 腸系膜明串珠菌 Leuconostoc mesenteroides (ATCC8293) +++ 嗜酸乳桿菌 Lactobacillus acidophilus (ATCC11506) +++ 保加利亞乳桿菌 Lactobacillus bulgaricus (ATCC11842) +++ 干酪乳桿菌 Lactobacillus casei (ATCC7469) +++ 萊希曼氏乳桿菌 Lactobacillus leichmannii (ATCC7830) +++ 植物乳桿菌 Lactobacillus plantarum (ATCC8014) +++ 發酵乳桿菌 Lactobacillus fermentans (ATCC9338) +++ 大腸桿菌 Escherichia coli (ATCC25922) -/+ 釀酒酵母 Sacch. cerevisae (ATCC9763) -