| 培養基名稱 | 酒清藍瓊脂，酒清藍培養基 |
|---|---|
| 英文名稱: | Spirit Blue Agar，Spirit Blue Medium |
| 培養基類型: | 鑒別培養基 |
| 產品目錄號: | M741-01，M741-02 |
| 產品規格: | 250g、500g 其它規格請聯系我們 |
| 保存條件: | 密封，陰涼干燥處保存。制備好的培養基2-8°C避光保存。 |
| 產品性狀: |
米灰色粉末。 米灰色凝膠。 |
| 注意事項: | 避免攝入、呼入、皮膚接觸。配制時在通風櫥中進行，戴口罩、手套、護目鏡。 |
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產品描述：
酒清藍瓊脂(Spirit Blue Agar)是一種鑒別培養基，與脂肪酶試劑結合，用于檢測和增菌脂解菌。
酒清藍培養基工作原理
適冷細菌, 霉菌或酵母菌，可以對牛奶和高脂肪乳制品的風味產生不利的影響。
蛋白胨作為碳源和氮源，提供維生素和礦物質。酵母提取物提供B族維生素，能夠刺激細菌生長。醇溶藍是脂肪水解指示劑。脂肪酶試劑以三丁酸甘油酯為脂肪來源。三丁酸甘油酯是天然脂肪和油脂中最簡單的甘油三酸酯，是非常好的脂肪酶底物，因為脂解微生物在三丁酸甘油酯存在的情況下優先水解三丁酸甘油酯，而不水解其它含長鏈脂肪酸的甘油酯。脂解菌代謝培養基中的脂肪，菌落周圍形成暈圈，表明脂肪被水解。
脂肪酶試劑，是三丁酸甘油酯（tributyrin）和吐溫80（polysorbate 80）的混合物。其它脂肪乳化液可以采用以下方法制備：向400ml去離子溫水中加入10g阿拉伯膠或1ml吐溫80，使其完全溶解。然后加入100ml棉籽油（或奶油、植物油、橄欖油），劇烈攪拌使其乳化。脂肪酶試劑是白色乳濁液。
酒清藍瓊脂培養基的用途：
酒清藍瓊脂用于脂肪水解試驗，鑒定微生物。
酒清藍瓊脂培養基被推薦用于檢測牛奶和乳制品。
酒清藍瓊脂培養基配方與配制方法
| 培養基成分： | 含量：/L |
|---|---|
| 胰酪蛋白胨 | 10.0 g |
| 酵母提取物 | 5.0 g |
| 細菌學瓊脂 | 15.0 g |
| 醇溶藍 | 0.15 g |
| 終溶液pH | 6.8± 0.2 |
配制方法：
1. 稱取本產品35g，加入1L純水，混合均勻。
2. 一邊加熱一邊攪拌，煮沸1min，使其完全溶解。121°C 滅菌 15min。
3. 待冷卻至50-55°C，加入30ml脂肪酶試劑或其它脂肪來源，混合均勻后倒平板。
實驗方法
將待測微生物接種到平板上，35 ± 2°C，最長培養72h。或者按照標準方法規定的其它條件培養。
1. Select the spirit blue agar plate medium.
2. Start your Bunsen burner.
3. Select the inoculating loop tool.
4. Flame your inoculating loop to sterilize it.
5. Remove the cap from your inoculum and your lid from your sample plate.
6. Flame the mouth of your inoculum tube.
7. Use the sterile inoculating tool to pick up an inoculum from the culture tube of the unknown bacterium.
8. Immediately transfer the inoculum into the fresh, sterile medium. NOTE: you must streak the inoculum back and forth across the plate for several seconds to inoculate the plate. You will know it has been successfully done when streak marks appear on the agar surface. 9. Flame the mouth of your inoculum tube once again.
10. Replace the cap on the inoculum tube and the plate lid.
11. Re-flame the inoculating tool.
12. Place the inoculated plate into the 35-37 C incubator.
13. Incubate for the appropriate length of time. For this test, 24 hours is sufficient for determining the result.
14. Retrieve desired incubated culture from the incubator.
15. Observe the test result, noting specifically the color of the medium surrounding colonies in the plate. The culture will show clear halos around colonies capable of breaking down lipids. The color surrounding colonies without lipase remains unchanged.
16. Record test result.
17. Dispose of the culture.
結果與分析
菌落周圍形成暈圈，菌落略帶藍色，表明脂肪被水解。如圖中A。B被脂肪水解陰性。ATCC標準菌株在酒清藍瓊脂上生長情況如下
ATCC標準菌株 生長情況 脂肪水解 Proteus mirabilis ATCC25933 良好 – Staphylococcus aureus ATCC25923 良好 + Staphylococcus aureus ATCC6538 良好 + Staphylococcus epidermidis ATCC12228 良好 +