| 產品名稱： | 脫羧酶肉湯基礎 |
|---|---|
| 英文名稱： | Decarboxylase Broth Base, Moeller |
| 培養基類型： | 鑒別培養基 |
| 級別： | for microbiology |
| 品牌： | ELITE-MEDIA（艾禮培養基） |
| 產品目錄號： | M116-01、M116-02 |
| 產品規格： | 100g、20支/盒(即用型) |
| 產品外觀： | 黃綠色均一粉末。 |
| 滅菌后顏色與澄清度： | 紫色透明溶液，無沉淀。 |
| 保存條件： | 密封，2-25°C保存。制備好的培養基2-8°C避光保存。 |
| 注意事項： | 避免攝入、吸入、皮膚接觸。 |
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產品描述：
脫羧酶肉湯基礎(Decarboxylase Broth Base, Moeller)加入合適的L-氨基酸后，用于基于脫羧氨基酸的能力鑒別細菌。工作原理
脫羧酶肉湯培養基用于鑒別革蘭氏陰性腸道桿菌，基于它們是否能偶脫羧氨基酸。脫羧酶肉湯用于檢測賴氨酸脫羧酶、鳥氨酸脫羧酶和精氨酸二水解酶活性。在鑒別克雷伯氏桿菌科與腸桿菌科細菌時，鳥氨酸脫羧酶的產生是十分有用的指標。克雷伯氏桿菌是不運動菌，不產鳥氨酸脫羧酶。而腸桿菌是能運動菌，產鳥氨酸脫羧酶，聚團腸桿菌（Enterobacter agglomerans）除外。脫羧酶肉湯培養基中含有牛肉浸粉、動物組織胃酶水解物，提供細菌生長所需的氮源營養。葡萄糖是可發酵碳水化合物，維生素B6是脫羧酶的輔助因子。溴甲酚紫和甲酚紅是酸堿指示劑。溴甲酚紫變色范圍為變色范圍5.2(黃色)～6.8(紫色)。甲酚紅變色范圍為pH7.2(黃)～8.8(紫紅)；pH2.0(橙色)～3.0(琥珀色)。當培養基中加入葡萄糖發酵型細菌時，由于發酵產酸，使得培養基pH降低，培養基由紫色變紅色。酸的生成刺激脫羧酶活性。賴氨酸脫羧產生尸胺（cadaverine），而鳥氨酸脫羧產生腐胺（putrescine）。精氨酸先脫氫生成鳥氨酸，接著鳥氨酸脫羧生成腐胺。胺的生成使得培養基pH升高，使得指示劑由黃色變回紫色。如果檢測的微生物不產合適的酶，培養基將保持酸性，呈黃色。每個待測分離物應該先接種到缺少相應氨基酸的基礎培養基中。接種后的試管必需用一層無菌礦物油液封以避開空氣。與空氣接觸會造成培養基表面的堿性反應，造成實驗結果無效。
配方與配制方法
| 成分 | g/L |
| 胃蛋白胨 | 5.0 |
| 牛肉浸粉 | 5.0 |
| D-葡萄糖 | 0.5 |
| 溴甲酚紫 | 0.01 |
| 甲酚紅 | 0.005 |
| 維生素B6 | 0.005 |
| pH | 6.0 +/- 0.2 |
配制方法：
1. 稱取10.52g本產品，用1000ml去離子水重懸。
2. 加入10g L-精氨酸或L-賴氨酸或L-鳥氨酸。加熱使培養基完全溶解。
3. 當加入L-鳥氨酸時，需要重新調節pH。
4. 分裝5ml到螺口試管中。
6. 121°C滅菌10min。
實驗方法
1. Inoculate the broth by transferring one or two well-isolated colonies from an 18-24 hour culture. Do not use broth culture2. Mix to distribute the inoculum throughout the medium.
3. Overlay the medium with 0.5 -1 ml of sterile mineral oil to protect from air.
4. Tighten caps.
5. Incubate 24 hours in 35 -37ºC.
6. Examine daily for purple color change.
7. Re-incubate up to 10 days if needed.
8. Each isolate tested should always include a control tube of base medium which does not contain the amino acid substrates. Only glucose is utilized in the control tube. If the control tube becomes positive, purple, the test is invalid.
結果與分析
35-37°C，培養4天，觀察培養物特征。ATCC標準菌株在Moeller脫羧酶肉湯中生長情況如下：| 標準菌株 (ATCC) | Lysine | Arginine | Ornithine |
| Citrobacter freundi (ATCC8090) | - | +/- | +/- |
| Enterobacter aerogenes (ATCC13048) | + | - | + |
| Escherichia coli (ATCC25922) | +/- | +/- | +/- |
| Klebsiella pneumoniae (ATCC13883) | + | - | - |
| Proteus vulgaris (ATCC13315) | - | - | - |
| Proteus mirabilis (ATCC25933) | - | - | - |
| Pseudomonas aeruginosa (ATCC9027) | - | - | + |
| Salmonella paratyphi A | - | (+) 或 + | + |
| Salmonella typhi (ATCC6539) | + | (+) 或 - | - |
| Shigella flexneri (ATCC12022) | - | - 或(+) | - |
| Shigella sonnei (ATCC25931) | - | +/- | + |
| Shigella dysenteriae (ATCC13313) | - | - 或 (+) | - |
| Serratia marcescens (ATCC8100) | + | - | + |
+ 陽性反應，紫色
- 陰性反應，黃色或顏色不變
± 可變的
(+) 延遲的陽性反應